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離心機(jī)是高?;蚩蒲袑?shí)驗(yàn)室,醫(yī)院檢驗(yàn)科,實(shí)驗(yàn)中必不可少的前處理儀器,看似通用的儀器,卻是有許多學(xué)問(wèn)的,實(shí)驗(yàn)操作中我們需要了解離心機(jī)知識(shí),能夠合理利用它而更穩(wěn)定地為我們的實(shí)驗(yàn)服務(wù)。離心機(jī)作為一種實(shí)驗(yàn)室通用儀器,幾乎每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都會(huì)配置一到兩臺(tái)甚至數(shù)臺(tái)。大家對(duì)其并不陌生,我們整理了一些關(guān)于離心機(jī)及其轉(zhuǎn)子種類的資料分享給大家。
臺(tái)式低速離心機(jī)TDZ5-WS(非冷凍常溫離心機(jī))
一、離心機(jī)技術(shù)的基本原理
1、離心力(force, F)
F = m * a = m * ω2r2
a:粒子旋轉(zhuǎn)的加速度
m:粒子的有效質(zhì)量,g為單位
ω:粒子旋轉(zhuǎn)的角速度,弧度/s為單位
r:粒子的旋轉(zhuǎn)半徑,cm為單位
2、相對(duì)離心力(relative centrifuge force, RCF)
通常離心力常用地球引力(g)的倍數(shù)來(lái)表示,因而稱為相對(duì)離心力(RCF)。常用數(shù)字×g來(lái)表示,例如13000g表示相對(duì)離心力為13000。相對(duì)離心力指在離心場(chǎng)中,作用與顆粒的離心力相當(dāng)于地球重力的倍數(shù),單位是重力加速度g(24500px/s2)。
RCF = ma/mg = mω2r2/mg = ω2r2/g
∵ω = 2π× (rpm)/60
∴RCF = 1.119 × 10-5 ×(rpm)2r
rpm:revolutions per minute為每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)
由上式可知,只要給出旋轉(zhuǎn)半徑r,則RCF和rpm之間可以相互換算。
由于轉(zhuǎn)頭的形狀及結(jié)構(gòu)的差異,每臺(tái)離心機(jī)的離心管從管口至管底的各點(diǎn)與旋轉(zhuǎn)軸之間的距離是不一樣的,所以在計(jì)算時(shí)規(guī)定旋轉(zhuǎn)半徑均用平均半徑rav代替,即最大半徑rmax和最小半徑rmin的平均值。
一般,低速離心時(shí)常以轉(zhuǎn)速rpm來(lái)表示,高速離心時(shí)則以g表示。報(bào)告離心條件時(shí)使用RCF比rpm要科學(xué),因?yàn)樗梢哉鎸?shí)地反映顆粒在離心管內(nèi)不同位置的離心力及其動(dòng)態(tài)變化。TGL20MW臺(tái)式大容量高速冷凍離心機(jī)
二、離心機(jī)的種類
離心機(jī)按用途分為工業(yè)用離心機(jī)和實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)。后者根據(jù)功能又分為制備性離心機(jī)和分析性離心機(jī)。制備性離心機(jī)一般用來(lái)分離各種生物材料,分離的樣品量比較大,也是大多數(shù)科研實(shí)驗(yàn)室配備的離心機(jī)種類。分析性離心機(jī)常用來(lái)研究純的生物大分子和顆粒的理化性質(zhì),一般有光學(xué)系統(tǒng),可監(jiān)測(cè)粒子在離心場(chǎng)中的行為,能推斷物質(zhì)的純度、形狀和分子量等,且都是超速離心機(jī)。此處和大家分享下幾種實(shí)驗(yàn)室常用的制備性離心機(jī)。
制備性離心機(jī)根據(jù)轉(zhuǎn)速可分為普通離心機(jī)、高速離心機(jī)、超速離心機(jī)等。具體如下:
1、普通離心機(jī)(常溫離心機(jī))
最大轉(zhuǎn)速低于10000rpm左右,容量為幾十毫升至幾升,分離形式是固液沉降分離,其轉(zhuǎn)速不能嚴(yán)格控制,通常不帶冷凍系統(tǒng),室溫操作,用于收集易沉淀的大顆粒物質(zhì),如:細(xì)胞等。在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常常能見(jiàn)到。
2、高速離心機(jī)(含高速冷凍離心機(jī)和常溫高速離心機(jī))
轉(zhuǎn)速為10000-30000rpm,一般都有制冷系統(tǒng),以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之間摩擦而產(chǎn)生的熱量,離心室的溫度可以調(diào)節(jié)和維持在0℃-4℃,可以嚴(yán)格準(zhǔn)確的控制轉(zhuǎn)速溫度和時(shí)間,并有指針或數(shù)字顯示。通常用于微生物菌體、細(xì)胞碎片、大細(xì)胞器、硫酸銨沉淀和免疫沉淀物等的分離純化工作,但不能有效地沉降病毒、小細(xì)胞器或單個(gè)分子。高速離心機(jī)是實(shí)驗(yàn)室中最常見(jiàn)的離心機(jī)類型,一般的分子實(shí)驗(yàn)室都會(huì)配備。
3、超速離心機(jī)
轉(zhuǎn)速可達(dá)30000rpm以上,離心容量由幾十毫升至2升,分離形式為差速沉降分離和密度梯度區(qū)帶分離,需嚴(yán)格配平(誤差<0.1g)。與高速離心機(jī)的主要區(qū)別是增加了真空系統(tǒng)。常用于分離亞細(xì)胞器、病毒、核酸、蛋白質(zhì)和多糖等。超速離心機(jī)價(jià)格較高。4、離心機(jī)可按放置方式分:立式離心機(jī)(也叫落地式離心機(jī))及臺(tái)式離心機(jī)(也叫桌面式離心機(jī))
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