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使用高速離心機(jī)分離生物大分子
生物大分子包括核酸、蛋白質(zhì)和多糖等。它們是一切生物機(jī)體形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能發(fā)揮zui重要的物質(zhì)基礎(chǔ),其分子量巨大、分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜,分子中包含有生命活動(dòng)的基本信息。近年來分子生物學(xué)研究的理論和實(shí)踐飛速發(fā)展。特別是功能基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的研究在揭示生命現(xiàn)象本質(zhì)中發(fā)揮著空前的積極作用。
HR/T16M臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)
離心過程中,樣品體積大,沉降路徑長,要相應(yīng)增加離心轉(zhuǎn)速或延長離心時(shí)間。樣品體積小,靠近離心管底部受到的離心力大,要相應(yīng)降低離心轉(zhuǎn)速或縮短離心時(shí)間??捎肒值近似確定離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間。
這些研究首先要從動(dòng)、植物組織或微生物組織中獲取相應(yīng)的目標(biāo)分子,離心技術(shù)為實(shí)現(xiàn)這一目的提供了一種zui為經(jīng)濟(jì)可靠的技術(shù)手段。由于任何生物大分子都是以不同的形式與其他分子結(jié)合在一起的,例如DNA與組蛋白或非組蛋白結(jié)合,所以分離時(shí)首先要根據(jù)大分子與其他分子的結(jié)合形式和特點(diǎn)選擇合適的介質(zhì)和方法破壞組織或細(xì)胞,再選擇萃取試劑從混合物里把大分子抽取出來,zui后用生物學(xué)和物理學(xué)方法進(jìn)行純化。離心法通常根據(jù)沉降速度不同用速率區(qū)帶分離,或根據(jù)浮力密度不同在不同類型的梯度溶液中用等密度法分離。3H20RI智能高速冷凍離心機(jī)
臺(tái)式冷凍水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)分離生物大分子概述
大多數(shù)分析和小規(guī)模制備生物大分子首選是臺(tái)式冷凍水平轉(zhuǎn)子離心機(jī),它能產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力,生物大分子在水平轉(zhuǎn)子的離心管中有較長的沉降路徑,壁效應(yīng)較小,可使生物大分子獲得精確分離。為獲得zui佳分辨率,樣品體積不應(yīng)超過梯度體積的3%,梯度上的樣品區(qū)帶應(yīng)該非常窄。
離心管尺寸和轉(zhuǎn)速不同,分離效果不同。小劑量樣品可用細(xì)長型離心管,大容量樣品可用粗短型離心管,它們都可使樣品區(qū)帶盡可能窄。然而,為了提高分辨率一味增加生物大分子的沉降路徑,會(huì)使離心時(shí)間延長。在此過程中,有些蛋白質(zhì)會(huì)失去活性。隨著沉降時(shí)間的延長引起的擴(kuò)散,會(huì)導(dǎo)致區(qū)帶變寬。
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